使用方法:
1.取样品25g(或mL)放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内,经充分振摇做成1:10的稀释液,用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液,以此类推,每次换一支吸管。
2.一般食品选3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5分钟。 ???? 3.用手指先沿方格区边缘刮一下,防止水外流,然后再在中间轻轻推刮,使水分在纸片方格区内均匀分布,并将气泡赶走。
4.将加了样的检验纸片每15片叠放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培养箱内培养48-72小时。
5.霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中(10-100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中霉菌和酵母菌的数目。
计数原则及报告方式:
1. 通常选择菌落在10-100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见例1)。 2. 若有两个稀释度的菌落数在10-100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则用值小者(见例2、例3)。 3. 若三个稀释度的菌落数都有在10-100个之内,应选择二个低数值的平均数(见例4)。 4. 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的最小值,或采用均大于数量标准的最大值(见例5、例6)。
例次 |
稀释度 |
两稀释 度之比 |
选定计数 稀释度 |
报告方式 (个/g或个/mL) |
10-1 |
10-2 |
10-3 |
1 2 3 4 5 6 |
158 208 265 98 8 295 |
76 68 82 50 5 174 |
5 12 50 15 1 106 |
— 1.8 6.1 — — — |
10-2 10-2、10-3 10-2 10-1、10-2 10-1 10-3 |
7.6×103 9.4×103 8.2×103 3.0×103 8.0×10 1.1×105 |
另:揭开上盖膜,用接种针挑取凝胶上的菌落可作进一步的分离和鉴定。使用过的纸片上带有活菌,需及时处理掉。 保存条件:本品需存放在8℃以下冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。
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