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Varian cary 100型紫外分光光度计标准操作规程

2010-12-11 中国食品网 中食网 324
一、目的:
建立Varian cary 100型紫外分光光度计标准操作规程,以保证Varian cary 100型紫外分光光度计的正确使用。
二、范围:
适用于Varian cary 100型紫外分光光度计操作的全部行为。
三、责任:
中心化验室对本SOP的实施全面负责。
四、内容:
4.1测定前的准备工作
4.1.1接通电源并将电源开关打开至“ON”位置,依次打开显示器、打印机及电脑主机进入Windows桌面。
4.1.2将仪器电源开关打开至“I”位置,仪器开始自检,自检完毕后,预热30分钟左右再进行测定。
4.2吸收光谱测定
4.2.1参数设置 在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标,进入Cary winUV子菜单选择Scan图标并双击,进入Scan控制界面。按Setup键,屏幕显示参数设定条件表,根据实验要求,对扫描起始波长和终止波长、测定量程方式、扫描控制参数、基线控制参数、是否参照扫描、是否打印参数等逐项进行设定或改变,待所需参数均设定好后应检查1次,以确认所有参数均已正确设定,按OK键。
4.2.2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置,盛以样品溶液的比色皿放入“2”号位置,关紧样品室门。在Scan控制界面上按Zero键调零,调零完毕按Start键,出现Save AS子菜单,在file name目录里输入样品名,按Save键,出现Sample name屏幕,按OK键,仪器进行扫描。扫描完毕按Print键打印结果。
4.3单波长数据测定
4.3.1参数设置 在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标,进入Cary winUV子菜单选择Simple Read图标并双击,进入Simple Read控制界面。按Setup键,屏幕显示参数设定条件表,根据实验要求,在Read at Wavelength选项里设定所需波长;在Ave Time(sec)选项里设定读信号时间;在SWB选项里设定光谱带宽;在Y Mode选项里设定测定量程方式;以吸收度显示选ABS等逐项进行设定或改变,待所需参数均设定好后应检查1次,以确认所有参数均已正确设定,按OK键。
4.3.2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置,盛以样品溶液的比色皿放入“2”号位置,关紧样品室门。按Zero键调零,调零完毕后在Simple Read控制界面上按Read键即自动读出测定结果,按Print键打印样品结果。
4.4标准曲线测定
4.4.1设置参数 在Windows桌面上用鼠标双击Cary winUV图标,进入Cary winUV子菜单选择Concentration图标并双击,进入Concentration控制界面。按Setup键,屏幕显示参数设定条件表,根据实验所需要求,对测定波长设定、对测定光谱带宽、测定量程方式、曲线建立方法、标准品数量、标准品浓度、样品数量、测量值单位、打印参数等逐项进行设定或改变,参数设定完毕,按OK键。
4.4.2将盛以对照溶液的比色皿放入样品池室的“1”号位置,盛以最低浓度标准品溶液的比色皿放入“2”号位置,按Zero键调零,调零完毕后,在Concentration控制界面上按Start键,进入Standard/Sample Selection控制界面,按OK键,出现Save AS子菜单,在file name目录里输入标准品名,按Save键,出现Present Standard控制界面,按OK键。依次放入盛以由低浓度至高浓度的标准品溶液的比色皿至“2”号位置,仪器进行标准曲线测定并分析。
4.4.3标准品测完毕后,换上待测样品溶液,按OK键,仪器将自动读出测定结果。按Print键打印测定结果。
4.5样品加温功能
样品如需加温,则可使用此功能。将加温控制器电源开关打开至“I”位置,接通泵的电源并把水泵放入预先装满2/3体积水的500ml烧杯里。在加温控制器的控制屏幕上按UP键或DOWN键设定所需温度即可。
4.6关机
取出比色皿冼净,依次关掉电脑主机、显示器、打印机及仪器电源开关,拔掉电源插头。
4.7注意事项
4.7.1比色皿使用完毕,立即用蒸馏水或有机溶液冲洗干净,并用柔软清洁的纱布把水渍擦净,以防表面光洁受损,影响正常使用。
4.7.2使用的比色皿必须洁净并保持样品室的洁净,否则会产生测量误差。
4.7.3供试品溶液的吸收读在0.3~0.7之间为宜,在此范围误差较小。
4.7.4设定的参数不恰当易得到不良的结果或图谱,如狭缝太宽使吸收值降低,分辨率下降;狭缝太窄则出现过大的噪音,使读数不准确。
4.7.5测定时注意样品室门应关紧,否则引入过多的杂散光,使吸收度读数下降。


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