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UV765紫外可见分光光度计操作规程

2010-11-19 中国食品网 中食网 339

一、开机
开机前将样品室内的干燥剂取出,确认电源是否连接。打开仪器电源开关,等待仪器自检通过,自检过程中禁止打开样品室。
二、使用
自检结束后(7个项目均出现OK字样),仪器进入主菜单,屏幕显示如下七个功能项:1.光度测量;2.光谱测量;3.定量测量;4.动力学测量;5.数据处理;6.多波长测定;7.系统状态设定。仪器经30min热稳定后,就可以进入正常测量。
1.光度测量 测定一定波长下的透光率(T%)或吸光度值(A)
在主菜单中选中[光度测量]项后,按[ENTER]键进入此功能块 → 按[GOTO WL]键进入波长设置用数字键输入你所需的波长值→ 按[ENTER]键确认→ 屏幕提示:请稍等……,仪器自动将波长移动到你所需测定的波长值→ 按[F1]键,选择测定透光率(T%)或吸光度值(A) → 打开样品室盖,将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R位和S1位,关上样品室盖→ 按[F3]键,仪器自动将比色皿架R位置移动到光路中(即空白溶液),屏幕上显示Cell=R → 按[AUTO ZERO]键,仪器自动对空白溶液调零。屏幕提示:请稍等…… → 按[F2]键,比色皿架移动到S1位(待测样品),屏幕上显示Cell=S1 → 按[F4]键测量T%或A值。
测量完成后
1)打印输出数据,按[START/STOP]键
2)返回主菜单,按[MODE]键
2. 光谱测量 波长扫描或光谱扫描,可直接测定一段波长范围内的光谱图和峰值谷值数据
在主菜单中选中[光谱测量]项后,按[ENTER]键进入此功能块 → 根据需要设定测量模式、扫描范围、记录范围、扫描速度、采样间隔、扫描次数、显示模式各参数。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向键到达设定行,进行参数的修改,并按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖,将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R位和S1位,关上样品室盖→ 按[F3]键,仪器自动将比色皿架R位置移动到光路中(即空白溶液),屏幕上显示Cell=R → 按[F1]键进行基线校正。屏幕提示:基线校正…… → 按[F2]键,比色皿架移动到S1位 (待测样品),屏幕上显示Cell=S1 → 按[START/STOP]键开始光谱扫描 → 屏幕显示扫描图谱。
扫描结束后
1) 打印结果谱图,按[F4]键
2) 直接读取峰谷值,按[F2]键,屏幕显示“请输入峰/谷检测灵敏度”(默认值为3),按[ENTER]键确认
3) 存储图谱,获取整个波长范围内的数据,按[F3]键,用[→]、[←]方向键选择10个数字和26个字母组成文件名,按[ENTER]键确认,按[F4]存储,按1~8数字键确定文件序列号
4) 修改谱图坐标范围,按[F1]键。修改完毕后,按[START/STOP]键确认后,谱图将按新设定坐标被刷新
5) 返回上一级菜单,按[MODE]键
3. 定量测定 建立浓度曲线,直接测定样品的浓度
主菜单中选中[定量测定]项后,按[ENTER]键进入此功能块 → 根据需要设定测量波长、测量单位、测量方法各参数。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向键到达设定行,进行参数的修改,并按[ENTER]键确认。
3.1 K系数法 已知斜率k和截距b,测出样品的吸光度值后待入公式就可算出浓度值
在测量方法中选择K系数法,并按[ENTER]键确认 → 按[F2]键,将k值和b值输入,按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖,在当前光路的比色皿架位中放入空白样品,关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 将样品放入比色皿架中 → 按[START/STOP]键进入数据测量界面→ 按[F2]键移动比色皿架,使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量。
3.2单点标定法 测量一个标准样品的吸光度与坐标零点建立工作曲线,测定未知样品浓度
在测量方法中选择单点标定法,并按[ENTER]键确认 → 按[F2]键修改单点 → 按数字键输入标准样品的浓度值 → 按[ENTER]键 → 打开样品室盖,在当前光路的比色皿架位中放入空白样品,关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 将空白样品换成标准样品→ 按[START/STOP]键测量标样的吸光度并显示 → 将样品放入比色皿架中 → 按[START/STOP]键进入样品测量界面 → 按[F2]键移动比色皿架,使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量。
3.3多点标定法 测量已知浓度的一系列标准样品吸光度,建立工作曲线来测定未知浓度
在测量方法中选择多点标定法,并按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖,在当前光路的比色皿架位中放入空白样品,关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 按[F2]键重新标定 → 按数字键输入标准样品数 → 按[ENTER]键确认 → 将标准样品依次放入比色皿架R、S1、S2位……关上样品室盖 → 按[F3]移动比色皿架R位到光路 → 按[ENTER]键确认 → 按数字键输入标样浓度值,按[ENTER]键确认 → 按[START/STOP]键测量标样的吸光度→ 按[ENTER]键确认 → 按[F2]键移样品位S1到光路,同样的方法测量所有标样的吸光度 → 按[F1]键生成方程曲线,显示该曲线的斜率k、截距b、相关系数R → 按[MODE]键返回定量测量菜单 → 按[START/STOP]键进入数据测量菜单 → 放入样品 →按[F2]键移动比色皿架,使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量。
4.多波长测定 同时测定几个波长下的透光率(T%)或吸光度值(A)
主菜单中选中[多波长测定]项后,按[ENTER]键进入此功能块 → 按[F3]键设定测量波长数目和样品池个数,按[ENTER]键确定 → 按数字键输入相应波长值 → 打开样品室盖,将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R、S1、S2位……,关上样品室盖 → 按[START/STOP]键开始测量。
测量完成后
1)打印输出数据,按[F4]键
2)返回主菜单,按[MODE]键
三、关机
将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净,倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。
注意事项:
1.开机前将样品室内的干燥剂取出,仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3~4/5为宜,不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁,池壁上液滴应用擦镜纸擦干,切勿用手捏透光面。测定紫外波长时,需选用石英比色皿。
3.测定时,禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上,如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏,要尽可能及时清理干净。
4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽,然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净,倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内,盖上防尘罩,做好使用登记,得到管理老师认可方可离开。
问题处理:
1、如果仪器不能初始化,关机重启;如不成功,请向管理老师反映。
2、如果吸收值异常,依次检查:波长设置是否正确(重新调整波长,并重新调零)、测量时是否调零(如被误操作,重新调零)、比色皿是否用错(测定紫外波段时,要用石英比色皿)、样品准备是否有误(如有误,重新准备样品)。


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