一、疫苗检查。疫苗瓶内应为真实状态。针头插入后，注射器内稀释液应自动吸入疫苗瓶，如不能自动吸入，说明疫苗瓶已失去真空，疫苗很可能已失效。
二、疫苗稀释。稀释量要准确。点眼、滴鼻、滴口的疫苗最终稀释量要准确到0.1毫升，可先取3毫升稀释液，用针头或滴管实际测量有多少滴，然后计算出鸡群接种需要的疫苗液滴数，推算出需加多少毫升稀释液；饮水免疫前先测出免疫前鸡群全天的饮水量，按2小时的饮水量稀释疫苗，保证鸡在2小时内饮完疫苗液；喷雾免疫要根据每分钟喷雾量、鸡群大小和需要喷雾的时间来推算稀释液用量；刺种免疫一般每100只鸡需刺种液1毫升。疫苗应现用现配，在阴暗处稀释，疫苗瓶应多次用稀释液冲洗，尽量将瓶内疫苗稀释到防疫液中。稀释温度一般在25~30摄氏度之间。
三、操作注意事项
1.点眼、滴鼻、滴口免疫时，针头或滴管要距离鸡眼、鼻、口1~2厘米；滴鼻时要用手指封住鸡的一侧鼻孔；滴口免疫最好每只鸡滴2滴，待疫苗吸干后才能放手。
2.饮水免疫前，冬季停止供水2~4小时，夏季停止供水1~2小时间；饮水器数量增加1倍，置于阴凉处；稀释液用纯水或深井水（pH)值为中性），不得含消毒剂和金属离子；为增加疫苗的活性，可加入0.2%~0.3%的脱脂奶粉，饮水免疫开始半小时后轻轻驱赶鸡群，让所有的鸡都饮上疫苗水。进行新城疫、传染性支气管炎疫苗免疫时，疫苗水要淹没鸡的鼻孔及眼睛部位。
3.喷雾免疫的鸡群要确认健康，尤其不能有呼吸道疾病感染，喷雾免疫要在密闭的情况下进行，光线要暗，最好在夜间关灯后操作。喷雾免疫要做到高温、高湿、少尘，湿度不宜低于70%。在鸡群上方50厘米处喷雾。喷雾20分钟后及时通风换气。
4.鸡痘刺种部位在鸡翅内侧无血管处，第二次接种在另一侧相应部位。接种后一周内检查接种部位有无结痂或红肿，如没有应重新接种。最好每栏或每50只鸡更换一次刺种针。
5.免疫接种前后2~3天尽量不用抗菌（病毒）药物、消毒剂、抗球虫药物，以免影响免疫效果。