河南大学国家食用菌加工技术研发专业中心
在UPLC-MS/MS和成分敲除法研究灵芝免疫活性的谱效关系方面取得进展。该成果以“Spectrum-effect relationship of immunologic activity of Ganoderma lucidum by UPLC-MS/MS and component knock-out method”为题发表在Food Science and Human Wellness （即时IF5.2307，JCR 2区）杂志。
灵芝为多孔菌科赤芝Ganoderma lucidum（Leyss. exFr.）Karst或紫芝Ganoderma sinense Zhao, Xu et Zhang的干燥子实体，有两千多年的药用历史。中国药典记载：味甘，性平，归心、肺、肝、肾经，具有补气安神，止咳平喘的功能。
本文主要研究灵芝调节免疫的活性成分，通过建立HPLC指纹图谱和谱效关系模型，预测灵芝乙醇提取物中的活性化合物，然后利用成分敲出技术分离得到目标化合物，通过高分辨质谱对化合物结构进行鉴定。建立BP神经网络模型，进行药效预测。
利用PLSR方法建立灵芝的谱效关系，结果分析发现，P7、P8、P13、P14、P17、P22、P23、P26、P28、P31、P32、P33、P41和P45与灵芝提取物激活RAW264.7细胞、增强免疫活性呈正相关；峰P3、P34、P39和P43与灵芝提取物增强免疫活性呈负相关。通过高分辨质谱法鉴定P14、P16、P18、P22、P24、P26、P28和P30为赤芝酸N、灵芝烯酸B、灵芝烯酸K、灵芝酸A、赤芝酸A、灵芝酸D、灵芝酸F和灵芝酸J。当样品的浓度相当于原药材200 μg/mL时，灵芝中同时存在激活和抑制RAW264.7细胞的化合物。以灵芝指纹图谱共有峰峰面积和免疫药效指标为样本训练BP神经网络，建立了灵芝谱效结合评价系统。所建BP网络模型相关系数R为0.98643，药效预测结果的误差均在理想的范围内。
通过本研究，确定了赤芝酸N、灵芝酸A、灵芝酸D和灵芝酸F是灵芝子实体中的免疫增强作用活性化合物，可以作为灵芝的活性标志物。
该方法的建立，以整体观，快速鉴定灵芝中活性化合物，体现了中药活性成分/群的多活性组分的作用。应用该方法，我们已经发表了系列文章，欢迎引用。
Food and Chemical Toxicology （https://doi.org/10.1016/j.fct.2019.110754）；
Food and Chemical Toxicology （https://doi.org/10.1016/j.fct.2021.112086）；
Food Science and Human Wellness （https://doi.org/10.1016/j.fshw.2021.02.019）；
International Journal of Molecular Sciences （https://doi.org/10.3390/ijms19113439）；
Frontiers in pharmacology（ https://doi.org/10.3389/fphar.2020.01342）；
Molecules （doi:10.3390/molecules22071231）
